一、Rubicon和Qiagen單細胞全基因組擴增試劑盒的對比

參考：

1.The comparison of the performance of four whole genome amplification kits on ion proton platform in copy number variation detection. Xinyi Zhang et al.

2.Rubicon 資料，RB3050說明書.

3.Qiagen 資料，150343說明書.

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二、產(chǎn)品介紹

Rubicon PicoPLEX WGA Kit單細胞全基因組擴增試劑盒

單管，3步，PicoPlEX WGA試劑盒專門用于人單細胞和pg級DNA的擴增，具有可重復性、低背景的特點。3小時內(nèi)完成細胞裂解、熱循環(huán)文庫制備和低背景擴增，zui終能得到2-5µg擴增DNA。

技術(shù)原理及特點

利用特殊隨機引物（Quasi-random primer）引發(fā)線性擴增進行全基因組擴增。

相比于以往的PCR、MDA、MALBC為基礎(chǔ)的單細胞全基因組擴增技術(shù)，操作簡單快速。擴增zui大優(yōu)勢：再現(xiàn)性良好。

REPLI-g Single Cell Kit 單細胞擴增試劑盒

REPLI-g Single Cell Kit 單細胞擴增試劑盒采用MDA技術(shù)，可均一的擴增單個細胞（1至1000個細菌或腫瘤細胞）或純化的基因組DNA，能夠覆蓋基因組所有位點。產(chǎn)量穩(wěn)定，可達40 µg（產(chǎn)物平均長度大于>10 kb）。適用于二代測序等新技術(shù)應用?？捎糜诎┌Y、干細胞或宏觀基因組學（metagenomics）研究。

技術(shù)原理及特點

REPLI-g Single Cell Kit 單細胞擴增試劑盒采用多重置換擴增（MDA，Multiple Displacement Amplification）技術(shù)，對所有基因組位點進行無偏差的擴增。與基于PCR的全基因組擴增技術(shù)相比，該技術(shù)具有更好的擴增保真度，避免出現(xiàn)假陽性或假陰性信號。

多重置換擴增(MDA)的恒溫基因組擴增技術(shù)包含了隨機六聚體與變性DNA的結(jié)合過程，以及使用Phi 29聚合酶在恒定溫度下進行的鏈置換合成過程。典型擴增能夠生成40 µg以上的DNA產(chǎn)量，而不受起始模板量影響，這意味著在大多數(shù)應用中無需進行額外的DNA濃度檢測，既可直接進行后續(xù)的遺傳學分析。

溫和的堿變性法

REPLI-g Kit采用溫和堿性孵育法，在DNA斷裂或去堿基化發(fā)生頻率非常低的情況下讓使其均勻地變性。這樣擴增得到的DNA具有非常高的完整性，擴增片段的長度達到zui大化，從而使基因組中的位點和序列都得以均勻呈遞。

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